導(dǎo)讀:加拿大康考迪亞大學(xué)研究人員開發(fā)了一種生物打印成體神經(jīng)元細(xì)胞的新方法。他們正在使用一種新的激光輔助技術(shù),可以保持高水平的細(xì)胞活力和功能。
研究人員開發(fā)了一種稱為激光誘導(dǎo)側(cè)轉(zhuǎn)移 (LIST) 的新生物打印技術(shù),通過使用不同粘度的生物墨水改進(jìn)現(xiàn)有的生物打印技術(shù),從而實現(xiàn)更好的3D打印。在文章中,他們證明了該技術(shù)可成功打印感覺神經(jīng)元,這是周圍神經(jīng)系統(tǒng)的重要組成部分。他們表示,這有利于生物打印潛力的長期發(fā)展,包括疾病建模、藥物測試和植入物制造。
圖 1. 激光誘導(dǎo)神經(jīng)元側(cè)向轉(zhuǎn)移 (LIST) 打印系統(tǒng)示意(A左)和生物油墨噴射(高速成像A.jpg (30.1 KB, 下載次數(shù): 88)
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△圖1. 激光誘導(dǎo)神經(jīng)元側(cè)向轉(zhuǎn)移 (LIST) 打印系統(tǒng)示意(A左)和生物油墨噴射(高速成像A右)。打印后1小時,帶有DRG神經(jīng)元的液滴。比例尺 = 50 μM ( B , C )。
可行且實用
研究人員使用小鼠周圍神經(jīng)系統(tǒng)的背根神經(jīng)節(jié) (DRG) 神經(jīng)元來進(jìn)行技術(shù)測試。神經(jīng)元懸浮在生物墨水溶液中,并加載到生物相容性基材上方的方毛細(xì)管中。低能納秒激光脈沖聚焦在毛細(xì)管中部,產(chǎn)生微氣泡膨脹并將充滿細(xì)胞的微射流噴射到其下方的基底上。將樣品短暫孵育,然后洗滌并重新孵育48 小時。
圖 2. 生物打印不會影響DRG神經(jīng)元的存活,但會減少神經(jīng)突觸的生長。.jpg (37.19 KB, 下載次數(shù): 70)
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△圖2. 生物打印不會影響DRG神經(jīng)元的存活,但會減少神經(jīng)突觸的生長。
然后,團(tuán)隊進(jìn)行了多次測試以測量打印細(xì)胞的容量。一項活力測定發(fā)現(xiàn),打印兩天后,86%的細(xì)胞仍然存活。研究人員指出,當(dāng)使用較低能量的激光時,存活率會提高。較高激光能量使用時,一些熱力學(xué)反應(yīng)更可能損壞細(xì)胞。
圖 3. 打印過程對辣椒素引發(fā)的鈣內(nèi)流的影響。.jpg (40.97 KB, 下載次數(shù): 70)
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△圖3. 打印過程對辣椒素引發(fā)的鈣內(nèi)流的影響。
其他測試測量了神經(jīng)突生長(其中發(fā)育中的神經(jīng)元在響應(yīng)指令時產(chǎn)生新的投射)、神經(jīng)肽釋放、鈣成像和RNA測序。總體而言,結(jié)果總體表明這項技術(shù)可能對生物打印領(lǐng)域做出重要貢獻(xiàn)。
對人和動物都有好處
研究人員指出,一般來說,當(dāng)談到生物打印時,人們往往會認(rèn)為科學(xué)家現(xiàn)在可以打印諸如移植人體器官之類的東西。雖然這是一個長期目標(biāo),但目前的技術(shù)還離得很遠(yuǎn)。仍有很多方法可以逐漸實現(xiàn)這一遠(yuǎn)大目標(biāo)。團(tuán)隊希望獲得批準(zhǔn),能夠繼續(xù)對細(xì)胞移植進(jìn)行研究,這可以極大地幫助藥物發(fā)現(xiàn),例如神經(jīng)恢復(fù)藥物。
圖 4. Printed-DRG神經(jīng)元釋放神經(jīng)肽。.jpg (17.51 KB, 下載次數(shù): 91)
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△圖4. Printed-DRG神經(jīng)元釋放神經(jīng)肽。
團(tuán)隊指出,使用這項技術(shù)的另一個優(yōu)勢是減少了動物試驗。這不僅有人道主義方面的意義,使更少的動物因為人類實驗被安樂死,而且它還將產(chǎn)生更準(zhǔn)確的結(jié)果,因為測試能夠在人類而非動物組織上進(jìn)行。
參考文獻(xiàn):Roversi, K.; Ebrahimi Orimi,H.; Falchetti, M.; Lummertz da Rocha, E.; Talbot, S.; Boutopoulos, C.Bioprinting of Adult Dorsal Root Ganglion (DRG) Neurons Using Laser-InducedSide Transfer (LIST). Micromachines 2021, 12, 865. https://doi.org/10.3390/mi12080865
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